GST pull-down實驗是一個有效驗證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗技術。將靶蛋白質-GST融合蛋白質親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白質親和的支撐物,充當“誘餌蛋白質”,目的蛋白質溶液過柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白質 ( 目的蛋白質 )”,洗脫結合物通過SDS-PAGE電泳分離,最后經 western blot,從而檢測兩種蛋白質間是否有相互作用。
“誘餌蛋白質”和“捕獲蛋白質”均可通過細胞裂解物、純化的蛋白質、表達系統(tǒng)以及體外轉錄翻譯系統(tǒng)等方法獲得 , 此方法簡單易行 ,操作方便 。