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盤點雜交瘤細胞技術制備單克隆抗體會遇到的問題

發(fā)表時間:2023-10-20 訪問次數:866

  雜交瘤細胞制備抗體技術相信大家都不覺得陌生了,它就是一種將免疫后的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后產生單克隆抗體的傳統(tǒng)方法。如果想了解雜交瘤相關的具體知識,可以點擊“什么是雜交瘤測序?它的操作流程是怎樣的?”查看。今天,普健生物在這里簡單和大家介紹一下有關雜交瘤技術制備單克隆抗體時常見的一些問題。

  一、微生物污染

  1、細菌和真菌污染一般都是因為操作不當所導致,除了實驗之前做好日常消殺外,還需要確保消毒劑的純度及質量;

  2、支原體污染則可能是因為血清制品以及相關實驗材料污染所導致,一般來說,短期污染沒什么明顯變化,但是時間長了之后可能會導致細胞生長緩慢。所以,在購買相關產品的時候,要盡量保證相關產品的純度,減少不必要的麻煩;

  3、原聲生物污染常見的主要為黑膠蟲,污染后會出現一些小黑點;

  二、細胞不生長

  1、最常見的原因是因為融合試劑有毒,需要進行替換;

  2、使用的血清質量很差,可以優(yōu)先考慮胎牛血清;

  3、添加劑比例不正常;

  三、細胞不分泌抗體

  1、細胞直接不分泌抗體一般來說主要是因為抗原免疫性差所導致,脾臟損傷嚴重等;

  2、后期分泌抗體越來越少主要因為骨髓瘤繁殖被抑制、克隆不及時以及染色體丟失等情況導致;

  四、細胞克隆困難

  1、對已有雜交瘤細胞進行篩選;

  2、在培養(yǎng)基中加入IL-6;

  其實大家不難看出,導致雜交瘤細胞制備抗體困難或失敗的原因主要是因為細節(jié)方面的錯誤操作導致。所以,我們在日??贵w制備時,不僅要嚴格按照實驗流程來,而且需要注意各個細節(jié)方面的問題。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤制備單克隆抗體服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。